ALDEFLUOR^®试剂盒提供了一种非免疫学的方法来鉴定骨髓、动员的外周血或脐带血中的干祖细胞，该方法是以乙醛脱氢酶（ALDH）的活性为基础。ALDH在所有活的原始造血细胞中高表达，可以将ALDH的底物-BAAA（Bodipy^TM-aminoacetaldehyde）转化为荧光产物BAA（Bodipy^TM-aminoacetate）。ALDH高表达的细胞呈现明亮的荧光（ALDH^br），可以通过流式细胞仪进行鉴定、评估和分离。ALDH^br的细胞包括CD34⁺细胞、CD133⁺细胞、 Kit⁺细胞、 Lin^-细胞、集落形成细胞、长期培养起始细胞(LTC-IC)以及NOD/SCID亚群细胞。此外，由于只有具有完整细胞膜的细胞才可以保留ALDEFLUOR^®的反应产物，因此ALDEFLUOR^®只鉴定活的ALDH^br细胞。

ALDEFLUOR^®　的工作原理：

1)     不带电荷的ALDH-底物（BAAA）通过扩散进入活细胞。

2)     BAAA被细胞内的ALDH转化为带负电荷的反应产物（BAA^-），该产物滞留在细胞内，使细胞呈现

      明亮的荧光。

3)     表达ALDH的细胞带有明亮的荧光，在流式细胞仪的绿色通道被检出。

4)     由于完整的细胞膜可以保留ALDEFLUOR^®的反应产物，ALDH^br细胞才能被鉴定。

怎样减少分离时间并增加ALDH^br细胞的纯度：

    在用ALDEFUOR^®分离造血干祖细胞之前，先用负选的方法对样品进行富集。

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