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pGEM -T 载体 |
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pGEM -T 载体系统是克隆PCR 产物的方便系统。pGEM-T载体是通过EcoRV 酶切pGEM-5Zf(+) 载体，并在两个3`末端加入胸腺嘧啶构建的。pGEM-T 载体插入位点3`-T 突出端可极大提高PCR 产物的连接效率，因为3`-T突出端可以防止载体的自身环化，并且为某些热稳定性聚合酶产生的PCR 产物提供一个匹配碱基。这些聚合酶常常以模板不依赖模式在扩增产物的3` 端加上一个脱氧腺苷酸。
pGEM -T 载体多克隆区T 突出端的两侧均有BstZI 酶切位点，使用BstZI 单酶消化即可释放插入片段。也可选用适当的双酶消化释放插入片段。pGEM -T载体系统II 除了pGEM -T 载体系统I 所有成分外，还包括JM109 感受态细胞。
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